正文

中文名稱：負(fù)染色

英文名稱：negative staining

定義：一種制備電子顯微鏡樣品圖像呈現(xiàn)負(fù)反差的技術(shù)。用于觀察樣品中的顆粒性物質(zhì)或生物大分子。用重金屬鹽(如磷鎢酸鈉、醋酸鈾等)對(duì)鋪展在載網(wǎng)上的樣品進(jìn)行染色，使整個(gè)載網(wǎng)都鋪上一層重金屬鹽，而有凸出顆粒的地方則沒有染料沉積。染色后，在電鏡下觀察時(shí)，被觀察的對(duì)象為亮的，背景為暗的，反襯出樣品中的生物大分子及其復(fù)合物的形態(tài)。

所屬學(xué)科：細(xì)胞生物學(xué)(一級(jí)學(xué)科) ；細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)(二級(jí)學(xué)科)

簡(jiǎn)介

用重金屬鹽(如磷鎢酸鈉、醋酸鈾等)對(duì)鋪展在載網(wǎng)上的樣品進(jìn)行染色，使整個(gè)載網(wǎng)都鋪上一層重金屬鹽，而有凸出顆粒的地方則沒有染料沉積。由于電子密度高的重金屬鹽包埋了樣品中低電子密度的背景，增強(qiáng)了背景散射電子的能力以提高反差，這樣，在圖像中背景是黑暗的，而未被包埋的樣品顆粒則透明光亮，這種染色稱為負(fù)染技術(shù)。負(fù)染色是只染背景而不染樣品，與光學(xué)顯微鏡樣品的染色正好相反。

應(yīng)用

電子染色的一種方法，背景是高電子密度區(qū)，樣品是低電子密度區(qū)，在電鏡下形成負(fù)的反差，主要用于病毒等生物大分子的觀察方法。

染色原理

負(fù)染色法需要使用酸性染料來染色，如伊紅或苯胺黑。因?yàn)榧?xì)菌體表面帶負(fù)電，而酸性染料的色原也帶負(fù)電，所以色原只能將背景染色，才能使沒有染色的細(xì)胞很容易的被觀察到。一些染色劑，如四氧化鋨和鐵氰化鋨，化學(xué)活性非常強(qiáng)。作為強(qiáng)氧化劑，它們主要與交鍵類脂和不飽和碳碳鍵反應(yīng)，從而改變樣本組織的生物膜特性并將其染色。