定義
細(xì)胞如何對(duì)各種胞外調(diào)節(jié)信號(hào)作出特異性應(yīng)答，即細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制的研究，是近年來(lái)的一個(gè)研究熱點(diǎn)。目前已知大多數(shù)細(xì)胞中存在兩條傳導(dǎo)細(xì)胞因子刺激信號(hào)的基本途徑：Ras-MAPK途徑和JAK-STAT途徑。前者在研究多種生長(zhǎng)因子的信號(hào)傳導(dǎo)中發(fā)現(xiàn)，可能主要與傳遞細(xì)胞增殖信號(hào)有關(guān)；后者發(fā)現(xiàn)于干擾素的信號(hào)傳導(dǎo)研究中，現(xiàn)在已知在幾乎所有細(xì)胞因子信號(hào)的傳遞中，該途徑都發(fā)揮著重要的作用[1，2]。JAK即Janus Kinase（兩面神激酶），是一種非受體型酪氨酸蛋白激酶（PTK）。該族成員有7個(gè)同源區(qū)（JH1~7），其中JH1區(qū)為激酶區(qū)，JH2區(qū)為偽激酶區(qū)。與其它PTK不同，JAK內(nèi)無(wú)Src同源區(qū)2(SH2）結(jié)構(gòu)，因其既能催化與之相連的細(xì)胞因子受體發(fā)生酪氨酸磷酸化，又能磷酸化多種含特定SH2區(qū)的信號(hào)分子從而使其激活，故稱(chēng)之為Janus-羅馬神話(huà)中前后各有一張臉的門(mén)神。STAT即Signal transducers and activators of transcription（信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子），含有SH2和SH3結(jié)構(gòu)域，可與特定的含磷酸化酪氨酸的肽段結(jié)合。當(dāng)STAT被磷酸化后，發(fā)生聚合成為活化的轉(zhuǎn)錄激活因子形式，進(jìn)入胞核內(nèi)與靶基因結(jié)合，促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄。現(xiàn)在已克隆成功4種JAK(JAK1~3和Tyk2）與6種STAT(Stat1~6）。
模式
該途徑的基本作用模式為：配體誘發(fā)相應(yīng)受體形成二聚體或寡聚體，引起與受體結(jié)合的JAK相互作用，發(fā)生自身酪氨酸磷酸化而激活；同時(shí)催化受體發(fā)生酪氨酸磷酸化，繼而以這些磷酸化的酪氨酸為“錨點(diǎn)”，招引多種含特定SH2區(qū)的信號(hào)分子，并將其活化，通過(guò)這些分子的作用使胞外信號(hào)傳入胞核內(nèi)。但隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)該途徑并非這樣簡(jiǎn)單，其調(diào)控機(jī)制精細(xì)多樣，與別的信號(hào)傳導(dǎo)途徑有錯(cuò)綜復(fù)雜的聯(lián)系。這方面的工作雖開(kāi)始不久，但取得的成果已使人們對(duì)信號(hào)傳導(dǎo)的認(rèn)識(shí)上升到了一個(gè)新的層次。
1.MAPK與JAK-STAT途徑
MAPK即絲裂原激活的蛋白激酶（Mitogen activated protein kinase），是Ras途徑中的下游信號(hào)分子，具有絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶活性，可激活C-Fos、C-Jun等轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，形成AP-1作用于核內(nèi)，激活特定的基因從而傳遞信號(hào)。MAPK的激活需要其分子中特定的Tyr殘基和Ser殘基同時(shí)被磷酸化。以前認(rèn)為，Ras途徑與JAK途徑雖共存于細(xì)胞因子的信號(hào)傳導(dǎo)中，但互相獨(dú)立。前者與Ⅰ型細(xì)胞因子受體C-端序列有關(guān)，后者則結(jié)合在受體胞漿區(qū)近膜端[4，5]。受體C-端序列缺失則不能激活Ras途徑，而JAK-STAT途徑不受影響。
最近的發(fā)現(xiàn)表明，MAPK可能處于調(diào)節(jié)這兩條途徑的關(guān)鍵位置。開(kāi)始時(shí)發(fā)現(xiàn)JAK的激活伴有MAPK的活化，且僅有JAK激活不足以使STAT最大程度地發(fā)揮其轉(zhuǎn)錄激活活性。接著證實(shí)，Stat3在傳導(dǎo)信號(hào)時(shí)不僅發(fā)生了Tyr殘基磷酸化，同時(shí)還有Ser殘基磷酸化，且磷酸化的Ser殘基為與DNA上的調(diào)節(jié)區(qū)結(jié)合所必需；并證明STAT蛋白上存在可被MAPK識(shí)別且磷酸化的特異性序列。與Stat3類(lèi)似，Stat1也必需有Ser殘基磷酸化才能完全活化。含這一Ser殘基的序列正是上述可被MAPK識(shí)別且磷酸化的特異性序列，并在體外成功的用MAPK使含此序列的多肽Ser殘基磷酸化。
體外實(shí)驗(yàn)表明，在經(jīng)Ⅰ型IFN刺激過(guò)的細(xì)胞中，MAPK與INFR-α鏈相互作用而被活化，隨之與Stat1相結(jié)合并促進(jìn)其活性。當(dāng)MAPK的作用被阻斷時(shí)，STAT促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄的活性降低。從以上現(xiàn)象可推論：STAT是MAPK的天然底物之一，細(xì)胞中存在著MAPK-STAT這一信號(hào)傳導(dǎo)的旁路或調(diào)節(jié)方式。新近發(fā)現(xiàn)生長(zhǎng)激素刺激的雄鼠肝細(xì)胞中，Stat5絲氨酸磷酸化后發(fā)揮與以前不同的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)活性，這一效應(yīng)很可能也是經(jīng)MAPK介導(dǎo)。
目前對(duì)JAK如何活化MAPK仍不清楚，可能是直接作用，也可能是通過(guò)活化Ras-MAPK途徑。Ⅰ型細(xì)胞因子受體如何活化Ras也不清楚，一般認(rèn)為應(yīng)與含PTK活性的生長(zhǎng)因子受體類(lèi)似。后者先誘導(dǎo)Shc磷酸化，再通過(guò)Shc與Grb2的SH-2、SH-3區(qū)募集Ras，并通過(guò)Shc與mSos活化Ras。已知IL-2、IL-3、IL-5、IL-6和EPO等都能誘導(dǎo)Shc磷酸化，而如干擾JAK與受體復(fù)合物的結(jié)合則使Shc磷酸化明顯降低。近來(lái)發(fā)現(xiàn)，EPO的這種作用不依賴(lài)EPOR與Shc的結(jié)合，而是經(jīng)Shc的SH-2區(qū)與JAK2上磷酸化的酪氨酸殘基相結(jié)合。已證實(shí)JAK2有使Shc磷酸化的功能，但是否有其它磷酸化蛋白參與Shc的活化與募集仍不清楚。
2.SH-PTP1的負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用
SH-PTP1即含SH2區(qū)的酪氨酸磷酸酶（PTPase1）。PTPase分為跨膜型與非跨膜型兩種，SH-PTP1和2都屬于后者。SH-PTP2參與受體型PTK介導(dǎo)的信號(hào)傳遞，可看作是一種正的信號(hào)傳遞分子；SH-PTP1則主要對(duì)PTK介導(dǎo)的信號(hào)傳遞起抑制作用。與其它廣泛表達(dá)的酪氨酸磷酸酶不同，SH-PTP1（又稱(chēng)PTP1C、HCP或SHP）主要表達(dá)于造血細(xì)胞中。起初發(fā)現(xiàn)SH-PTP1在IL-3作用后與IL-3Rβ鏈結(jié)合，經(jīng)SH-PTP1反義RNA作用后，IL-3Rβ鏈磷酸化水平升高。不能正常表達(dá)SH-PTP1的Motheaten小鼠表現(xiàn)出多種造血異常及免疫異常，其CFU-E前體細(xì)胞對(duì)EPO高度敏感，常伴有系統(tǒng)性自身免疫性疾病。
已知IL-3和EPO都主要通過(guò)JAK2傳導(dǎo)信號(hào)[3，4]。不久前證實(shí)，EPOR上第429位酪氨酸在EPO作用后被JAK磷酸化，從而具備了結(jié)合SH-PTP1并使之活化的能力。這一作用的特異性取決于該殘基周?chē)囟ǖ陌被嵝蛄校碢Y-Leu-Tyr-Leu-Val-Val，含有這段序列的11肽即足以結(jié)合并活化SH-PTP1。EPOR上此種酪氨酸的缺失可使細(xì)胞對(duì)EPO的敏感性升高5到10倍。EPOR野生型的細(xì)胞、JAK2的酪氨酸磷酸化水平在EPO作用后很快恢復(fù)正常，而表達(dá)上述第429位酪氨酸突變的EPOR的細(xì)胞，這一指標(biāo)長(zhǎng)時(shí)間保持在高水平。IL-3R中含有與EPOR中SH-PTP1結(jié)合位點(diǎn)相似的序列，提示在IL-3的信號(hào)傳導(dǎo)中可能存在類(lèi)似的負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制。
與之類(lèi)似，當(dāng)IFN-α作用后，IFN-α受體可與SH-PTP1可逆性結(jié)合。同樣，接受這種刺激的Moptheaten小鼠巨噬細(xì)胞中，JAK1和Stat1酪氨酸磷酸化水平明顯高于正常，而對(duì)Ⅰ型IFN信號(hào)傳導(dǎo)同樣重要的TYK2，Stat2活化水平則無(wú)明顯變化。已知在Ⅰ型IFN信號(hào)傳導(dǎo)中，JAK1特異性的活化Stat1，而Tyk1特異性的活化Stat2。因此可認(rèn)為，上述現(xiàn)象是SH-PTP1選擇性作用于JAK1所致，其具體機(jī)制值得進(jìn)一步研究。最近發(fā)現(xiàn)，SH-PTP1的兩個(gè)SH2區(qū)中，N-端SH2區(qū)可與其分子內(nèi)的酶活性區(qū)結(jié)合而起自身抑制作用，當(dāng)此區(qū)與其它分子結(jié)合時(shí)，SH-PTP1即被激活；而C-端的SH2區(qū)對(duì)其活性無(wú)明顯影響，只參與其募集過(guò)程。
3.JAK和/或STAT的功能
STATs調(diào)節(jié)的基因范圍很廣：IFN調(diào)控基因的表達(dá)需要Stat1和2；IL-6誘導(dǎo)的急性期反應(yīng)基因的表達(dá)需要Stat3；Stat5介導(dǎo)催乳素誘導(dǎo)的多種基因表達(dá)；Stat6為IL-4誘導(dǎo)的免疫球蛋白類(lèi)別轉(zhuǎn)換和MHCⅡ類(lèi)抗原與免疫球蛋白受體等的上調(diào)所必需。目前看來(lái)，Stats與細(xì)胞因子引起的增殖反應(yīng)無(wú)關(guān)，IL-2、IL-4和IL-6都可使突變型受體不激活STAT而引發(fā)增殖反應(yīng)。
有人發(fā)現(xiàn)，果蠅中JAK同源體的突變可導(dǎo)致其細(xì)胞轉(zhuǎn)化。HTLV-1感染引起的細(xì)胞轉(zhuǎn)化據(jù)認(rèn)為也是JAK-STAT的激活所致，可能為直接或間接地以一種類(lèi)似受體介導(dǎo)的方式激活該途徑。在v-src轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中，觀察到有組成性的Stat-3酪氨酸磷酸化，這一效應(yīng)是否需JAK介導(dǎo)尚不清楚。這種細(xì)胞中可觀察到有JAK家族激酶活化，但在其它系統(tǒng)中觀察到v-src可直接活化Stat-3。v-ab1轉(zhuǎn)化的小鼠前B細(xì)胞中，JAK1、JAK3表現(xiàn)出組成性激酶活性，且可激活通常是由IL-4、IL-7誘導(dǎo)的STAT活性，而此時(shí)并無(wú)此兩種IL存在。以上證據(jù)提示，JAK和/或STATs激活可能與細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān)。EGF、CSF-1和PDGF均能誘導(dǎo)STAT活化，在這些系統(tǒng)中STAT的作用還不清楚。近來(lái)發(fā)現(xiàn)EGF激活Stat-1、3不依賴(lài)JAK，而是經(jīng)EGFR內(nèi)的激酶區(qū)起作用，盡管這時(shí)有JAK1活化。目前看來(lái)，EGF的生長(zhǎng)信號(hào)主要由Ras途徑傳導(dǎo)。STAT對(duì)c-fos等已知早期基因的激活作用不大，提示可能存在其它未知的靶基因。
已知JAK能直接或間接磷酸化Vav，PLC-β1等其它信號(hào)分子，從而激活其它信號(hào)傳導(dǎo)通路。IL-4誘導(dǎo)的胰島素受體底物（IRS)1、2的磷酸化也需JAK的活化。而經(jīng)其相應(yīng)的受體型酪氨酸蛋白激酶?jìng)鲗?dǎo)信號(hào)的細(xì)胞因子，如EGF、PDGF，CSF-1等，也能誘導(dǎo)STAT活化。綜上所述，可見(jiàn)JAK和STAT除了共同構(gòu)成JAK-STAT途徑傳導(dǎo)信號(hào)外，各有其相對(duì)獨(dú)立的作用。
4.其它調(diào)節(jié)JAK/STAT途徑的分子
IFN-γ主要通過(guò)誘導(dǎo)Stat-1同源二聚體（又稱(chēng)IFN-γ反應(yīng)因子，簡(jiǎn)稱(chēng)GAF）形成而傳導(dǎo)信號(hào)，已知IFN-γ可抑制Th2細(xì)胞的增生而對(duì)Th1細(xì)胞無(wú)此作用。近來(lái)發(fā)現(xiàn)，這是因?yàn)門(mén)h1細(xì)胞缺乏IFN-γ受體的β鏈（又稱(chēng)輔助因子1/AF-1），不能誘導(dǎo)GAF形成之故。上文提到，Ⅰ型IFN誘導(dǎo)GAF形成受SH-PTP1的選擇性調(diào)節(jié)，提示體內(nèi)JAK-STAT途徑受到十分精細(xì)的調(diào)節(jié)。Th1/Th2的失衡可導(dǎo)致多種疾病，這些發(fā)現(xiàn)使我們有可能在分子水平上理解這種失衡，并對(duì)其進(jìn)行干預(yù)。
最近研究發(fā)現(xiàn)，腺苷酸環(huán)化酶激活劑forskolin可明顯抑制IFN誘導(dǎo)的IFNR、JAK1、TRK2和Stat1、Stat2的磷酸化，以及與IFN反應(yīng)元件結(jié)合的復(fù)合物的形成；而forskolin經(jīng)修飾失去腺苷酸環(huán)化酶激活活性后，對(duì)JAK-STAT途徑不起任何作用，提示蛋白激酶A（需cAMP以激活）可能對(duì)JAK-STAT途徑起調(diào)節(jié)作用。
5.研究展望
目前對(duì)JAK的結(jié)構(gòu)仍未完全搞清。除了活化位點(diǎn)外，還有數(shù)個(gè)未確定的磷酸化位點(diǎn)，它們可能參與募集其它信號(hào)分子。JAK與受體近膜區(qū)結(jié)合的功能域還未確定，JAK同源區(qū)和偽激酶區(qū)的功能尚待研究。關(guān)于STAT也有許多問(wèn)題沒(méi)有搞清：如STAT多聚體怎樣轉(zhuǎn)入核內(nèi)，與STAT同屬一類(lèi)的IRF-1、ICSBP等是否與其它STAT成員結(jié)合而發(fā)揮功能等。各種不同的JAK和STAT基因敲除（gene knock out）小鼠將有助于解答這些問(wèn)題。
此外，JAK和STAT與疾病的關(guān)系及其應(yīng)用研究，也是一個(gè)很吸引人的領(lǐng)域。這方面已發(fā)現(xiàn)一例先天性JAK3缺乏的患兒，其癥狀類(lèi)似于性聯(lián)重癥聯(lián)合免疫缺陷?。╔SCID），但為常染色體隱性遺傳。急性白血病患者外周血細(xì)胞中，STAT相關(guān)性轉(zhuǎn)錄因子組成性活化，可能是白血病的病因之一。此外，可能還存在機(jī)理更復(fù)雜的相關(guān)疾病，有待進(jìn)一步研究。
總之，對(duì)JAK-STAT途徑的研究在解答以往疑問(wèn)的同時(shí)，引出了許多更為復(fù)雜的問(wèn)題。此領(lǐng)域的研究，尤其是在JAK-STAT與其它信號(hào)傳導(dǎo)途徑之間的關(guān)系方面，必將有助于更全面深入地理解信號(hào)傳導(dǎo)這一重大的生命之謎。
