正文

發(fā)生遺傳學(xué)

影響因素

發(fā)生遺傳學(xué)在方法學(xué)上主要是利用這些影響發(fā)育的突變型，并結(jié)合實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的方法，從不同水平來分析基因和性狀發(fā)育之間的關(guān)系，以闡明基因控制發(fā)育的機(jī)理。因此它同胚胎學(xué)、畸胎學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)，尤其是與細(xì)胞分化過程中基因表達(dá)及其調(diào)控方面的研究有著密切的關(guān)系。

簡史

遺傳是發(fā)育的基礎(chǔ)，而發(fā)育是遺傳的實(shí)現(xiàn)。兩者之間的關(guān)系歷來是遺傳學(xué)家和胚胎學(xué)家共同關(guān)心的問題。早在19世紀(jì)末期，德國生物學(xué)家A.魏斯曼就曾經(jīng)試圖建立發(fā)育和遺傳的統(tǒng)一理論。他曾經(jīng)假定全部發(fā)育過程是受細(xì)胞核控制的，卵裂過程中核內(nèi)遺傳物質(zhì)的不等分配是胚胎分化的主要原因。這一理論的原有形式雖然被早期實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)的實(shí)驗(yàn)事實(shí)所否定，但他提出的問題卻吸引了幾代生物學(xué)家的繼續(xù)探討。美國細(xì)胞學(xué)家E.B.威爾遜1928年在《發(fā)育和遺傳中的細(xì)胞》一書中提出基因在細(xì)胞水平的活動(dòng)是發(fā)育的根本原因這一論點(diǎn)，認(rèn)為發(fā)育是“遺傳特性按一定時(shí)、空秩序的表現(xiàn)”?；蛘摰膭?chuàng)建人美國遺傳學(xué)家兼實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)家T.H.摩爾根在他晚年（1934）的著作《胚胎學(xué)和遺傳學(xué)》一書中也強(qiáng)調(diào)遺傳學(xué)和胚胎學(xué)統(tǒng)一的重要性，并提出在發(fā)育的“不同時(shí)期有不同的一組基因起作用”的論點(diǎn)。

最早用實(shí)驗(yàn)方法確定了染色體在發(fā)育中的重要性的是德國實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)家T.H.博韋里。他根據(jù)對(duì)海膽受精卵分裂球發(fā)育的分析結(jié)果，認(rèn)為正常發(fā)育依賴全套染色體的正常組合，每一個(gè)染色體對(duì)發(fā)育都有特殊的影響。美國遺傳學(xué)家R.B.戈德施米特對(duì)基因在發(fā)育中的作用給以很大的重視。他在1935年發(fā)現(xiàn)擬表型，認(rèn)為基因突變和環(huán)境因子的作用一樣，都可能干擾相同的發(fā)育過程。致死基因和畸型發(fā)育的研究對(duì)發(fā)生遺傳學(xué)的形成也起過重要的推動(dòng)作用。

1955年瑞士實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)家E.哈多恩在《發(fā)生遺傳學(xué)和致死因子》一書中系統(tǒng)地總結(jié)了致死突變型引起異常發(fā)育的大量材料，并用實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)方法對(duì)這些病理發(fā)育過程進(jìn)行分析，促進(jìn)了對(duì)正常發(fā)育中基因作用機(jī)制的了解。1963年H.格呂內(nèi)貝格在《發(fā)育病理學(xué)》一書中提出基因作用多效性概念，認(rèn)為胚胎是一個(gè)高度復(fù)雜的相互作用系統(tǒng)，任何與發(fā)育有關(guān)的突變都可能對(duì)胚胎發(fā)育產(chǎn)生廣泛的影響。因此應(yīng)透過對(duì)各種病理發(fā)育現(xiàn)象的分析找出基因在細(xì)胞水平作用的原初效應(yīng)。70年代初 C.L.馬克特和 H.烏爾施普龍合寫了《發(fā)生遺傳學(xué)》，把當(dāng)時(shí)散見于各方面的有關(guān)資料匯總起來，初創(chuàng)了這門學(xué)科的體系。

長期以來胚胎學(xué)家致力于用實(shí)驗(yàn)方法分析發(fā)育的生理原因，尤其著重組織者的研究，因而忽視了發(fā)育的遺傳基礎(chǔ)。對(duì)異屬誘導(dǎo)系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明誘導(dǎo)者只起激發(fā)作用，被誘導(dǎo)出來的器官的種屬特性則取決于起反應(yīng)的細(xì)胞本身的遺傳特性。例如把蛙的外胚層移植到蠑螈的頭部，被誘導(dǎo)形成的口器是蛙特有的角質(zhì)腭和吸盤。這些事實(shí)促使胚胎學(xué)家注意發(fā)育和遺傳關(guān)系問題。1940年英國實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)家兼遺傳學(xué)家C.H.沃丁頓在《組織者和基因》一書中首先提出從基因和細(xì)胞質(zhì)環(huán)境的相互作用來理解反應(yīng)能力、誘導(dǎo)和決定等胚胎學(xué)基本概念的主張。但限于當(dāng)時(shí)生物學(xué)發(fā)展水平，還不能對(duì)基因控制發(fā)育的分子機(jī)制作深入的研究。

50年代中期以來的分子生物學(xué)的重大進(jìn)展使解決遺傳和發(fā)育關(guān)系問題的條件逐漸成熟起來。遺傳信息傳遞的中心法則揭示了生物的遺傳和發(fā)育的內(nèi)在聯(lián)系。從分子水平看來，細(xì)胞分化和性狀發(fā)育都是表型專一的大分子合成的結(jié)果，因而歸根結(jié)蒂依賴基因在發(fā)育過程中按一定的時(shí)空秩序的表達(dá)?；虻谋磉_(dá)又可以用相應(yīng)的信使核糖核酸（mRNA）的轉(zhuǎn)錄和專一的蛋白質(zhì)（如結(jié)構(gòu)蛋白、酶等）的合成來追蹤。1976年美國分子生物學(xué)家E.戴維森所寫的《早期發(fā)育中的基因活動(dòng)》一書代表從分子水平探討發(fā)育和遺傳關(guān)系問題的發(fā)展趨向。目前研究核酸分子結(jié)構(gòu)和功能的方法日臻完善，尤其是遺傳工程技術(shù)提供了前所未有的研究基因結(jié)構(gòu)、表達(dá)及其調(diào)控的有力的手段。這就為從分子水平探討發(fā)生遺傳學(xué)問題，特別是研究影響特定發(fā)育過程的單個(gè)基因（或基因群）的作用開辟了新的前景。

對(duì)象和方法

發(fā)生遺傳學(xué)開始于對(duì)黑腹果蠅發(fā)育的遺傳學(xué)分析。從摩爾根時(shí)代以來已積累了大量有關(guān)果蠅遺傳和發(fā)育的實(shí)驗(yàn)資料和許多影響發(fā)育的突變型。果蠅的唾腺巨大染色體上疏松區(qū)的消長可以反映不同發(fā)育時(shí)期的基因活動(dòng)情況。此外，對(duì)體表形態(tài)構(gòu)造的變異也便于作精細(xì)的描述。這些都是果蠅這一實(shí)驗(yàn)材料的優(yōu)點(diǎn)，缺點(diǎn)是較難得到足夠量的可供生化分析的樣品。另一個(gè)常用的材料是小鼠，也有許多遺傳背景清楚的純系和致死突變型（如T基因座位）可供發(fā)生遺傳學(xué)研究，不過同樣存在取材上的困難。用海膽作為研究對(duì)象則便于取得較大量的材料，特別是同一發(fā)育階段的材料，可是可供研究的突變型較少。英國分子生物學(xué)家 S.布倫納在 60年代倡導(dǎo)用一種營自由生活而繁殖迅速的秀麗隱桿線蟲（Caenorabditis elegans) 作材料。這種動(dòng)物身體和各器官的細(xì)胞數(shù)少而恒定，胚胎發(fā)育屬于鑲嵌型，每一個(gè)器官的來源有確定的細(xì)胞譜系可循，而且便于用實(shí)驗(yàn)方法得到許多突變型。低等真核生物如粘菌（Dictyosteliumdiscoideum）由于生活史和形態(tài)發(fā)生的特點(diǎn)，也被一些人用來作為發(fā)生遺傳學(xué)的研究對(duì)象。此外，甚至有人采用更為簡單的對(duì)象如細(xì)菌形成芽孢的過程、噬菌體的自動(dòng)裝配過程等作為一個(gè)發(fā)育模型來進(jìn)行發(fā)生遺傳學(xué)研究。

應(yīng)用突變型進(jìn)行遺傳學(xué)分析是發(fā)生遺傳學(xué)的基本研究方法。此外，實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)方法（如移植、離體培養(yǎng)等）、細(xì)胞生物學(xué)方法（如核移植、細(xì)胞化學(xué)技術(shù)等）、生化方法（如同功酶測定等）和分子生物學(xué)方法（如重組DNA技術(shù)、分子雜交等）都是常用的實(shí)驗(yàn)手段。70年代以來重組DNA技術(shù)的應(yīng)用使有可能直接研究沒有發(fā)生突變的野生型基因的作用。

研究主題

動(dòng)物的發(fā)育是從受精開始，通過受精卵的核質(zhì)之間、分裂球之間、以及胚胎不同部位之間的相互作用，使基因按一定時(shí)空秩序表達(dá)，從而控制細(xì)胞和器官原基的逐步?jīng)Q定和分化的過程。動(dòng)物的發(fā)育類型（鑲嵌卵或調(diào)整卵）不同，基因控制發(fā)育的具體方式也可能不同。果蠅（鑲嵌卵）的發(fā)育中細(xì)胞的發(fā)育命運(yùn)決定得早，胚胎發(fā)育主要表現(xiàn)為一連串由大到小的發(fā)育區(qū)逐步劃分的過程。兩棲類（調(diào)整卵)的發(fā)育中細(xì)胞的命運(yùn)決定得晚，細(xì)胞遷移和相互作用在發(fā)育中起重要的作用。截至20世紀(jì)70年代發(fā)生遺傳學(xué)的知識(shí)還主要是從果蠅上得到的。

核質(zhì)關(guān)系和母體效應(yīng)

細(xì)胞核移植實(shí)驗(yàn)證明果蠅前囊胚層細(xì)胞核具有全部發(fā)育潛能，而囊胚層細(xì)胞核的發(fā)育潛能已開始受到限制，這可能是受到卵表層細(xì)胞質(zhì)的影響的結(jié)果。紫外線損傷和卵質(zhì)移植實(shí)驗(yàn)證明位于卵后端的極質(zhì)能決定遷移到這區(qū)域中的細(xì)胞核的發(fā)育命運(yùn)，使它們形成原始生殖細(xì)胞。無尾兩棲類（如蛙和瓜蟾）中也存在類似的現(xiàn)象，它們的原始生殖細(xì)胞是由位于卵的植物極的生殖質(zhì)決定的。

絕孫突變型雌性果蠅的囊胚細(xì)胞核不能及時(shí)遷入極質(zhì)區(qū)域，生殖細(xì)胞因而不能正常發(fā)生。這表明卵質(zhì)特性是在卵子發(fā)生過程中受母體基因決定的，這一現(xiàn)象稱為母體效應(yīng)。某些母體效應(yīng)突變型如雙腹端（bicaudal,bic）和背方 (dorsal,dl）能廣泛影響胚胎發(fā)育的格局。純合雙腹端 (bic/bic）雌蠅所產(chǎn)的一部分卵只發(fā)生成為兩個(gè)腹端，彼此沿前后軸對(duì)稱排列，而缺少頭、胸和其他腹節(jié)。純合背方 (dl/dl）雌蠅的胚胎構(gòu)造全部背方化，而前后極性仍然保持。這兩個(gè)母體效應(yīng)基因各自定位在染色體的一個(gè)位置上。有人假定它們的野生型基因產(chǎn)物的濃度在卵內(nèi)各自沿前后軸和背腹軸呈梯度分布，從而決定了果蠅胚胎的正常發(fā)育格局。

細(xì)胞的決定和發(fā)育區(qū)劃分

利用帶有不同遺傳標(biāo)記的胚胎細(xì)胞的嵌合體可以追溯細(xì)胞決定的時(shí)期、發(fā)育命運(yùn)以及器官原基奠基細(xì)胞的數(shù)目。得到嵌合體的常用方法有3種：

在果蠅中可以利用環(huán)狀X染色體常在受精卵的第一次有絲分裂過程中丟失的特性取得雌雄嵌合體。例如雌性親本的兩個(gè) X染色體上全部都是野生型基因，不過其中一個(gè)是環(huán)狀染色體；雄性親本的一個(gè)X染色體上帶有3個(gè)隱性突變基因（白眼w，黃體y和分叉剛毛bi）。這兩個(gè)親本交配后可以產(chǎn)生一種帶有一個(gè)環(huán)狀X染色體和一個(gè)有3個(gè)隱性基因的X染色體的受精卵。這種受精卵第一次卵裂核分裂后，一個(gè)子細(xì)胞帶有這兩個(gè)X染色體，因而發(fā)育成嵌合體上具有野生型表型的雌性部分（XX）；另一個(gè)子細(xì)胞由于丟失了環(huán)狀 X染色體，因而發(fā)育成為具有突變型表型的雄性部分（X0）。兩部分之間有清楚的分界面。由于第一次核分裂的紡錘體的取向不同，含XX和X0細(xì)胞群的分界面也有不同。因此所得到雌雄嵌合體可以是左右各半、前后各半或者是其他種種形式。利用雌雄嵌合體的這些特點(diǎn)，便可以制作各器官原基在囊胚層上的預(yù)定命運(yùn)圖。其原理是兩個(gè)成體器官（如翅和頭）的原基細(xì)胞在囊胚層上相距愈近，則嵌合體分界線通過兩原基之間的機(jī)率就愈小。因此帶有不同遺傳標(biāo)記的兩個(gè)構(gòu)造在嵌合體上出現(xiàn)的百分比可作為這兩個(gè)原基之間相對(duì)距離的量度（為了紀(jì)念首先提出這種設(shè)想的A.H.斯特蒂文特，用sturt作為單位，一個(gè)sturt代表 1%個(gè)體中嵌合體分界線通過所研究的兩個(gè)原基）。如果再測出這兩個(gè)構(gòu)造中每一個(gè)對(duì)第三個(gè)構(gòu)造（如吻）的相對(duì)距離就可以確定某一器官的原基在囊胚層上的相對(duì)位置。推而廣之，便可以做出各器官在囊胚層上的預(yù)定命運(yùn)圖（見圖）。

在一定發(fā)育時(shí)期用X射線誘發(fā)胚胎細(xì)胞中的有絲分裂交換（見連鎖和交換），使單個(gè)胚胎細(xì)胞及其子細(xì)胞群帶上遺傳標(biāo)記，便可鑒定發(fā)育時(shí)期細(xì)胞的決定狀態(tài)。例如用X射線照射小體（M）雜合體（M/M+）果蠅的囊胚層期胚胎，可以誘發(fā)體細(xì)胞染色體交換而在生長緩慢的雜合體細(xì)胞背景上出現(xiàn)一片生長迅速的野生型純合M+/M+細(xì)胞。這種細(xì)胞群決不跨越兩個(gè)體節(jié)，說明體節(jié)的決定可能發(fā)生在囊胚層期或稍后的一次分裂期。晚一些時(shí)候照射所得到的一個(gè)標(biāo)記細(xì)胞群決不越過同一體節(jié)的前部和后部的分界線，說明體節(jié)的前部和后部這時(shí)已經(jīng)決定。再晚些時(shí)候照射，得到的一個(gè)標(biāo)記細(xì)胞群就不再同時(shí)包含背方和腹方的構(gòu)造，也就是說發(fā)生了背腹的分區(qū)。器官發(fā)生過程中還會(huì)逐漸發(fā)生更進(jìn)一步的分離。象這樣每一來源于少數(shù)幾個(gè)奠基細(xì)胞的細(xì)胞群所占據(jù)身體或器官上的一定區(qū)域稱為發(fā)育區(qū)。屬于一個(gè)發(fā)育區(qū)的細(xì)胞決不會(huì)越界同其他發(fā)育區(qū)的細(xì)胞混合。發(fā)育區(qū)可看作是發(fā)育的基本單位，它在許多方面具有“場區(qū)”的性質(zhì)。同一發(fā)育區(qū)內(nèi)發(fā)育格局可以調(diào)整，而不同發(fā)育區(qū)之間則是鑲嵌的、不可調(diào)整的。果蠅的發(fā)育過程是一系列由大到小發(fā)育區(qū)愈分愈細(xì)的過程。這一現(xiàn)象稱為發(fā)育區(qū)劃分。

把基因型不同的兩種小鼠的早期胚胎在體外人工地并合在一起，然后移回到母鼠子宮內(nèi)，便能發(fā)育成嵌合體，稱為異表型嵌合體。通過異表型嵌合體研究，在小鼠中測定了色素細(xì)胞、毛囊、生殖腺以及其他內(nèi)臟的奠基細(xì)胞的數(shù)目。例如生殖腺的奠基細(xì)胞數(shù)是2～9。

發(fā)育途徑的決定和轉(zhuǎn)變

果蠅成蟲的器官原基──成蟲盤在胚胎發(fā)育的早期已經(jīng)決定了，但要等到幼蟲變態(tài)時(shí)受到激素的影響才開始分化。E.哈多恩曾把成蟲盤（如生殖板原基）移植到成蟲腹腔內(nèi)，經(jīng)過連續(xù)70次以上的傳代（超過1000次細(xì)胞分裂）后再移植到將要變態(tài)的幼蟲體內(nèi)仍然可以按照預(yù)定的命運(yùn)分化為生殖板。這說明細(xì)胞的決定和分化在時(shí)間上是可以分隔的。細(xì)胞雖然經(jīng)過了上千次的分裂仍然可以保持原來的決定狀態(tài)。然而成蟲盤經(jīng)過若干次移植傳代后偶爾可能改變其決定狀態(tài)，分化成和它原來的預(yù)定命運(yùn)不同的器官（如觸角）。這一現(xiàn)象稱為轉(zhuǎn)決，它說明細(xì)胞的發(fā)育命運(yùn)可以改變。

影響果蠅發(fā)育途徑的還有一種突變型稱為同源異形突變型，它能使一種發(fā)育途徑轉(zhuǎn)變到另一種發(fā)育途徑，例如使平衡棒原基發(fā)育成為翅，觸角原基發(fā)育成為足等。同源轉(zhuǎn)化的影響限于一個(gè)發(fā)育區(qū)內(nèi)，如反雙胸突變（cbx）能將中胸后部（翅的后部）轉(zhuǎn)化為后胸后部（平衡棒的后部）。根據(jù)同源異形突變型的作用方式，有人設(shè)想它的野生型基因在正常發(fā)育過程中可能起選擇和維持特定發(fā)育途徑的作用，因此稱之為選擇基因。果蠅胚胎發(fā)育中發(fā)育區(qū)的劃分是由大到小逐步進(jìn)行的，其中每一步都可能受一個(gè)（或一組）選擇基因的控制。發(fā)育程序的遺傳控制

在果蠅和小鼠等動(dòng)物中都發(fā)現(xiàn)有一類控制某些酶活性在胚胎發(fā)育中出現(xiàn)的時(shí)間和地位的基因，稱為時(shí)序基因。例如黑腹果蠅的淀粉酶為2號(hào)染色體上兩個(gè)頭尾相連的結(jié)構(gòu)基因所編碼。在它們的附近有一個(gè)基因map，它的3個(gè)等位基因mapa、mapb、mapc控制著淀粉酶在中腸出現(xiàn)的時(shí)間和地位。小鼠的 5號(hào)染色體上有一個(gè)編碼β-葡萄糖苷酸酶的結(jié)構(gòu)基因Gus，和它緊密連鎖的有一個(gè)控制酶出現(xiàn)時(shí)間的時(shí)序基因Gut。Gut基因發(fā)生突變后，β-葡萄糖苷酸酶在各種組織中出現(xiàn)的時(shí)間便被擾亂。

此外，果蠅等雙翅目昆蟲的幼蟲唾腺染色體上的疏松區(qū)也是研究基因活動(dòng)的時(shí)空秩序的好材料。疏松區(qū)是光學(xué)顯微鏡下可觀察到的染色體的局部膨大的部分，累積大量新合成的mRNA，是進(jìn)行活躍的轉(zhuǎn)錄活動(dòng)的基因所在的地方。果蠅發(fā)育過程中染色體不同部位的疏松區(qū)按一定的時(shí)間順序出現(xiàn)，說明這些基因在不同的發(fā)育時(shí)期起作用。蛻皮激素能誘發(fā)特定的疏松區(qū)出現(xiàn)，說明這一激素是通過調(diào)節(jié)該基因的活動(dòng)而參與控制發(fā)育的。

致死突變型也常用作研究發(fā)育程序的遺傳控制的材料，因?yàn)槭古咛グl(fā)育在特定階段停頓的基因中間有許多是控制該特定發(fā)育階段的基因。許多這類突變型是溫度敏感的，在果蠅和線蟲都獲得了一些溫度敏感的突變型，而且已發(fā)現(xiàn)不同的突變型常使發(fā)育停頓在不同的階段，某些突變型還影響幾個(gè)發(fā)育階段。

基因影響發(fā)育的機(jī)制

影響發(fā)育的基因究竟通過什么途徑或基因產(chǎn)物起作用，這也是必須回答的問題。這方面研究得較為深入的是小鼠的T復(fù)合座位或T基因復(fù)合體，它位于17號(hào)染色體上，包括6個(gè)互補(bǔ)群。除野生型基因和顯性的突變型T以外，還包括一系列的隱性致死或半致死突變型t。雜合體（T/t）具有短尾，純合體（T/T）則造成胚胎早期畸形和夭折。一系列的隱性致死或半致死突變型 (t）各自對(duì)早期發(fā)育的一定階段專一地起作用。例如t12影響滋養(yǎng)外胚層和內(nèi)胚層細(xì)胞團(tuán)的分離而使發(fā)育停頓在桑椹期；t0作用在胚外外胚層和外中胚層分離的時(shí)期；t9影響原條期而使中胚層細(xì)胞向內(nèi)遷移受阻，因而造成中軸器官發(fā)育異常。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)基因的原初效應(yīng)可能影響細(xì)胞表面抗原和它的下方的微絲，從而干擾了原腸運(yùn)動(dòng)正常進(jìn)行。

各個(gè)野生型基因的功能可能是控制早期發(fā)育中細(xì)胞表面特定分子按順序的表達(dá)，從而保證形態(tài)發(fā)生運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞間相互作用按正常的發(fā)育程序有條不紊地進(jìn)行。對(duì)于多數(shù)控制發(fā)育的基因來說，它們究竟編碼什么蛋白質(zhì)還不清楚，那些控制基因活動(dòng)的時(shí)空秩序的基因的作用機(jī)制則更不了解了。

從分子水平研究基因如何控制發(fā)育，對(duì)于解決發(fā)育和遺傳關(guān)系這一生物學(xué)基本問題有重要的理論意義。在實(shí)踐上，這方面研究的進(jìn)展又是了解病理發(fā)育（畸胎、腫瘤等）的發(fā)生機(jī)制，以及把遺傳工程方法應(yīng)用到高等動(dòng)物，治療遺傳病或改變經(jīng)濟(jì)動(dòng)物遺傳性的必要的理論前提。