注入法、薄膜分散法、超聲波分散法、逆向蒸發(fā)法。
脂質(zhì)體作為藥物載體的臨床應(yīng)用
脂質(zhì)體
1、抗腫瘤藥物載體:阿霉素脂質(zhì)體和順鉑脂質(zhì)體已在國(guó)外上市。2、抗寄生蟲(chóng)藥物載體:苯硫咪唑脂質(zhì)體和阿苯達(dá)唑脂質(zhì)體等。利用脂質(zhì)體的被動(dòng)靶向性,提高藥物的生物利用度,減少用量,降低毒副作用。
3、抗菌藥物載體:慶大霉素脂質(zhì)體和兩性霉素B,可減少藥物的耐藥性,降低心臟毒性。
4、激素類藥物載體。
給藥途徑
脂質(zhì)體的給藥途徑主要包括(1)靜脈注射;(2)肌內(nèi)和皮下注射;(3)口服給藥;(4)眼部給藥;(5)肺部給藥;(6)經(jīng)皮給藥;(7)鼻腔給藥。
脂質(zhì)體與細(xì)胞之間作用的主要形式包括膜間轉(zhuǎn)運(yùn)(細(xì)胞膜的脂質(zhì)交換)、接觸釋藥、吸附、融合和內(nèi)吞。
脂質(zhì)體具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu),進(jìn)入體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體自身的免疫功能,并改變包封藥物的體內(nèi)分布,使藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄,從而提高藥物的治療指數(shù)、減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性。 新型靶向脂質(zhì)體
脂質(zhì)體
1、前體脂質(zhì)體:將脂質(zhì)吸附在極細(xì)的水溶性載體如氯化鈉、山梨醇等聚合糖類(增加脂質(zhì)分散面積)制成前體脂質(zhì)體,遇水時(shí)脂質(zhì)溶脹,載體溶解形成多層脂質(zhì)體,其中載體的大小直接影響脂質(zhì)體的大小和均勻性。前體脂質(zhì)體可預(yù)防脂質(zhì)體之間相互聚集,且更適合包封脂溶性藥物。
2、長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體:經(jīng)過(guò)PEG修飾,以增加脂質(zhì)體的柔順性和親水性,通過(guò)單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬,減少脂質(zhì)體脂膜與血漿蛋白的相互作用,延長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間,稱為長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體(long-circulating liposome)。長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體有利于肝脾以外的組織或器官的靶向作用。同時(shí),將抗體或配體結(jié)合在PEG的末端,既可保持長(zhǎng)循環(huán),又可保持對(duì)靶體的識(shí)別。 3、免疫脂質(zhì)體:脂質(zhì)體表面聯(lián)接抗體,對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別,提高脂質(zhì)體的靶向性。如在絲裂霉素(MMC)脂質(zhì)體上結(jié)合抗胃癌細(xì)胞表面抗原的單克隆抗體3G制成免疫脂質(zhì),在體內(nèi)該免疫脂質(zhì)體對(duì)胃癌靶細(xì)胞的M85殺傷作用比游離MMC提高4倍。 4、熱敏脂質(zhì)體:利用在相變溫度時(shí),脂質(zhì)體的類脂質(zhì)雙分子層膜從膠態(tài)過(guò)渡到液晶態(tài),脂質(zhì)膜的通透性增加,藥物釋放速度增大的原理制成熱敏脂質(zhì)體。例如將二棕櫚酸磷脂(DPPC)和二硬脂酸磷脂(DSPC)按一定比例混合,制成的3H甲氨喋呤熱敏脂質(zhì)體,再注入荷Lewis肺癌小鼠的尾靜脈后,再用微波加熱腫瘤部位至42℃,病灶部位的放射性強(qiáng)度明顯的高于非熱敏脂質(zhì)體對(duì)照組。 脂質(zhì)體
5、pH敏感性脂質(zhì)體:由于腫瘤間質(zhì)的pH比周圍正常組織細(xì)胞低,選用對(duì)pH敏感性的類脂材料,如二棕櫚酸磷脂或十七烷酸磷脂為膜材制備成載藥脂質(zhì)體。當(dāng)脂質(zhì)體進(jìn)入腫瘤部位時(shí),由于pH的降低導(dǎo)致脂肪酸羧基脂質(zhì)化成六方晶相的非相層結(jié)構(gòu),從而使膜融合,加速釋藥。總之,脂質(zhì)體作為藥物載體是臨床應(yīng)用較早,發(fā)展最為成熟的一類新型靶向制劑。美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市的脂質(zhì)體產(chǎn)品有兩性霉素B、阿霉素脂質(zhì)體。批準(zhǔn)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的脂
質(zhì)體有丁胺卡鈉霉素。未來(lái)脂質(zhì)體的研究主要集中在以下三個(gè)方面: 1、膜結(jié)構(gòu)與載藥性質(zhì)之間的關(guān)系;
2、脂質(zhì)體在體內(nèi)的靶向特性;
3、在體外培養(yǎng)中將基因和其他物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)有望成為基因藥物載體。
脂質(zhì)體是由脂雙分子層組成的顆粒,可介導(dǎo)基因穿過(guò)細(xì)胞膜。通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)比利用病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移具有以下明顯的優(yōu)勢(shì):①脂質(zhì)體與基因的復(fù)合過(guò)程比較容易;②易于大量生產(chǎn);③脂質(zhì)體是非病毒性載體,與細(xì)胞膜融合將目的基因?qū)爰?xì)胞后,脂質(zhì)即被降解,無(wú)毒,無(wú)免疫原性;④DNA或RNA可得到保護(hù),不被滅活或被核酸酶降解;⑤脂質(zhì)體攜帶的基因可能轉(zhuǎn)運(yùn)至特定部位;⑥體外和體內(nèi)試驗(yàn)都表明,接近染色體大小的DNA片段也能被轉(zhuǎn)運(yùn)至宿主基因組中并增長(zhǎng);⑦轉(zhuǎn)染過(guò)程方便易行,重現(xiàn)性好。 脂質(zhì)體是具有雙層膜的封閉式粒子,自身聚集性脂類分子包封內(nèi)水相介質(zhì),可分為大、小多層,寡多層和單室脂質(zhì)體,醫(yī)學(xué)應(yīng)用較多為小單室脂質(zhì)體。基于脂質(zhì)體作為藥物載體系統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn),理想的用于轉(zhuǎn)運(yùn)基因的脂質(zhì)體,對(duì)于質(zhì)粒DNA具有高包封率,保護(hù)DNA不被血漿核酶降解的特點(diǎn),它們粒徑分布范圍窄,粒徑平均為100nm或者更小。為使脂質(zhì)體接近血管外區(qū)域,故采用具有廣泛的結(jié)合潛力脂類,這種特殊脂類可促進(jìn)與細(xì)胞膜融合和/或提高脂質(zhì)體在循環(huán)系統(tǒng)中的穩(wěn)定性。第1種為傳統(tǒng)上的脂質(zhì)體,人們可控制其體外行為,但不能控制其體內(nèi)行為,它們很快被滅活或被固定;第2種為無(wú)活性脂質(zhì)體(即不與外界作用),由于聚合物包封于表面的立體穩(wěn)定性而抑制其相互作用;第3種脂質(zhì)體表面結(jié)合抗原、凝集素或其他基團(tuán),由于表面結(jié)合的特定配基,也可特定地相互作用;第4種為反應(yīng)活性脂質(zhì)體,如離子型、靶敏感型和融合性脂質(zhì)體,這種脂質(zhì)體有時(shí)指相轉(zhuǎn)變的多孔脂質(zhì)體,脂質(zhì)體內(nèi)有離子敏感亞基,Ca2+其他金屬離子敏感性脂質(zhì)體,也包括陽(yáng)離子脂質(zhì)體,陰離子脂質(zhì)體。陰離子脂質(zhì)體不屬于有反應(yīng)活性類,但特殊的試驗(yàn)如試管內(nèi)與相反電荷(多)離子相互作用例子除外。 常規(guī)脂質(zhì)體進(jìn)入細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)DNA實(shí)驗(yàn),其原理是脂質(zhì)體增強(qiáng)細(xì)胞體的聚集,即加速大分子、荷電多的分子透過(guò)膜,該過(guò)程相當(dāng)復(fù)雜,尤其在包封較大片段時(shí),在實(shí)踐中這種技術(shù)只在體外使用且要用融合劑,荷電越多用途越少。